熒光物質測定儀操作流程詳解:
一、樣品準備與裝載
1.樣品預處理
根據(jù)樣品類型(液體、固體或薄膜)選擇合適的處理方式:
液體樣品:需過濾去除顆粒物,避免干擾熒光信號;若為高濃度樣品,需用溶劑稀釋至線性檢測范圍內。
固體樣品:研磨成均勻粉末后溶解于適量溶劑,或直接壓片制成透明薄片。
生物樣品(如細胞):需通過裂解液釋放熒光物質,離心后取上清液。
關鍵點:確保樣品無自發(fā)熒光雜質(如某些塑料容器),建議使用石英比色皿或專用樣品盤。
2.裝載樣品
打開ZW-3樣品室艙門,將預處理后的樣品注入專用樣品盤。
關閉艙門時避免震動,防止樣品濺出或位置偏移。
注意事項:若測量揮發(fā)性樣品,需在密閉環(huán)境中操作以減少損失。
1.光源選擇與校準
根據(jù)熒光物質激發(fā)波長選擇光源類型:
氙燈:適用于寬波段激發(fā),需預熱10-15分鐘以達到穩(wěn)定輸出。
LED光源:波長特異性高,無需預熱但需確認與樣品激發(fā)峰匹配。
調整光源強度:初始設置為中等強度,后續(xù)根據(jù)熒光信號強度微調,避免光漂白或檢測器飽和。
2.檢測器參數(shù)優(yōu)化
靈敏度設置:
高濃度樣品:選擇低靈敏度檔位,防止信號溢出。
低濃度樣品:啟用高靈敏度檔位,配合增益調節(jié)提升信噪比。
積分時間:根據(jù)熒光衰減特性設置,長壽命熒光物質需延長積分時間。
校準步驟:運行空白樣品(純溶劑)扣除背景噪聲,確?;€穩(wěn)定。
3.波長掃描設置(可選)
若需分析熒光光譜,設置激發(fā)波長范圍和發(fā)射波長范圍,儀器將自動掃描并生成光譜圖。
三、熒光物質測定儀測量與數(shù)據(jù)采集
1.啟動測量
在控制軟件中點擊“開始”按鈕,ZW-3將按預設參數(shù)執(zhí)行以下操作:
光源激發(fā)樣品,檢測器實時采集熒光信號。
系統(tǒng)自動扣除背景噪聲,生成原始數(shù)據(jù)曲線。
動態(tài)監(jiān)測模式:對光穩(wěn)定性差的樣品(如某些染料),可設置連續(xù)測量間隔,觀察熒光強度隨時間變化。
2.實時監(jiān)控與調整
觀察軟件界面中的熒光強度曲線,若信號波動超過5%,需檢查:
樣品是否均勻分布。
光源是否穩(wěn)定(通過內置參考光強計確認)。
檢測器是否過熱(需暫停測量冷卻)。
根據(jù)實時數(shù)據(jù)微調參數(shù)(如降低光源強度或縮短積分時間)。
四、熒光物質測定儀數(shù)據(jù)處理與分析
1.熒光強度計算
儀器自動應用預設公式計算結果。
相對定量:以標準品為參照,計算樣品相對熒光強度。
多波長分析:對光譜數(shù)據(jù)擬合高斯曲線,確定最大發(fā)射波長和半峰寬。
2.結果輸出與存儲
打印報告:選擇“導出”功能生成PDF或Excel文件,包含樣品信息、參數(shù)設置、熒光曲線及計算結果。
數(shù)據(jù)備份:將原始數(shù)據(jù)和處理后的數(shù)據(jù)保存至指定文件夾,建議按日期-項目名分類存儲。
高級分析:通過配套軟件進行動力學擬合(如一級反應速率常數(shù)計算)或主成分分析(PCA)。
